Имя: протеазы
Синонимы: эндопептидазу K; Прок; Протеазы К; Tritirachium album протеиназы К Регистрационный номер CAS: 39450-01-6
EINECS: 254-457-8
Протеиназы К (также протеазы К или эндопептидазную K) EC 3.4.21.64 является широкого спектра действия серинпротеазой. Фермент был открыт в 1974 году в экстрактах гриба Engyodontium album (ранее Tritirachium album). [1] протеиназы К способны переварить родной кератин (волосы), отсюда и название "протеиназы К". Преобладающий сайт расщепления является пептидной связью, прилегающей к карбоксильной группе алифатических и ароматических аминокислот с блокируемым Альфа-аминогруппы. Он широко используется для его широкой специфики.
Протеиназы К широко используется в молекулярной биологии, чтобы переварить белок и удаления загрязнений из препаратов нуклеиновых кислот. Добавление протеиназы К в нуклеиновую кислоту, препараты быстро инактивирует нуклеазы, которые могли бы ухудшить ДНК или РНК в процессе очистки. Это очень подходит для этого применения, так как фермент активен в присутствии химических веществ, которые денатурируют белки, такие как ДСН и мочевины, хелатирующие агенты, такие как ЭДТА, сульфгидрильных реагентов, а также трипсина или химотрипсина ингибиторов. Протеиназы К также устойчивы в широком диапазоне рН (4-12), с оптимумом рН- рН 7,5-12.
Активности фермента по отношению к нативным белкам стимулирует денатурирующие, такие как ДСН. В противоположность этому, при измерении с использованием пептидных субстратов, денатурирующие ингибируют фермент. Причина этого результата состоит в том, что агенты денатурации разворачивают основания белка и делают их более доступными для протеазы..